课程代码：
课程中文名称: 细胞生物学实验
课程英文名称：Cell biology experiment
课程类别：必修
课程学分数：
课程学时数：30
授课对象：生物工程专业
本课程的前导课程：细胞生物学
一、 教学目的
训练学生熟练地掌握普通光学显微镜的结构、性能和使用方法，了解几种特殊显微镜和电镜的一般原理和使用方法；掌握显微镜临时标本的制备，会进行显微测量、细胞计数和染色体观察；初步能进行细胞生理观察、细胞化学成分显示、染色体标本制备；初步掌握细胞培养、细胞冻存与复苏、细胞融合等技术的原理和方法；了解细胞放射自显影技术的原理和操作步骤；掌握实验报告的书写和镜下绘图的技能.
二、 教学要求
1．熟悉细胞生物学的研究方法，掌握细胞生物学的基本技术，重点掌握细胞的显微观察、细胞器的分离、细胞的超活染色等基本内容。培养学生具有初步的科学实验能力及严谨的科学作风，同时验证细胞的重点基本理论知识，加深感性认识。
2、学会准确详实地记录实验现象和数据的技能，提高实验报告的写作能力。培养严谨细致的科学作风和团结互助的合作精神，鼓励学有余力的学生自行设计实验或参与实验教改，思想活跃，积极与老师交流意见，鼓励学生勇于创新。
三、 课程内容与学时分配
实验一 细胞膜的渗透性
【目的和要求】
1 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
2 熟悉细胞的跨膜运输内容。
【实验内容】
1 测定低渗溶液中的羊红细胞的渗透性（水溶液）
2 测定甘油、乙醇、丙酮等物质进入鸡血红细胞的速度，判断各种物质、离子穿膜与否及快慢。
【重难点】
通过溶血与否及溶血快慢，判断分析物质穿膜与否及穿膜快慢。等渗溶液的概念。
【注意事项】
1 血细胞的活性，选取活性较好的血细胞。
2 溶血的判断及计时，肉眼无法判断时，采用显微镜进行判断。
3 振荡时要轻柔，避免机械破坏血细胞，造成假象。
实验二 叶绿体的分离与荧光观察
【目的和要求】
1 通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。
2 观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。
【实验内容】
1学习叶绿体的分裂与荧光显色观察。
2组织匀浆悬浮在等渗溶液中差速离心，分离叶绿体。
3组织切片和分离的叶绿体荧光染色，通过荧光显微镜观察。
【重难点】
1 叶绿体的形态结构及不同植物、不同状态时叶绿体的分布、数量。
2 叶绿体的分离和观察方法。
【注意事项】
1 吖啶橙有毒，使用时应小心。
2 分离叶绿体和其它细胞器时的离心转速选用。
3 荧光显微镜的使用。
实验三 减数分裂压片标本制备与观察
【目的和要求】
1掌握减数分裂过程的分期和特征。
2 加深对细胞分裂的认识。
3 了解动植物生殖细胞的形成过程。
【实验内容】
1观察蝗虫的永久切片，绘制减数分裂各个时期形态。
2 以蝗虫精巢为材料，找出减数分裂细胞并绘制。
【重难点】
自制片的制作与减数分裂细胞的寻找。永久片的各个时期的细胞的分辨。
【注意事项】
1 蝗虫的捕捉及固定。
2 显微镜的使用。
3 永久片的保护。
实验四 液泡系和线粒体的活体染色
【目的和要求】
1 观察动物、植物活细胞内线粒体、液泡的形态、数量与分布。
2 学习一些细胞器的超活染色技术。
【实验内容】
1 以人口腔粘膜上皮细胞为材料，超活染色后，进行观察，绘制图片并指明线粒体形态、数量及分布。2以洋葱鳞茎为材料，分别用不同染色液染色，然后显微镜观察，分别绘图表示液泡和线粒体分布。3 以小麦根尖为材料，进行液泡系的超活染色，绘制图片并不同区域液泡的形态及大小。
【重难点】
超活染色的方法和原理
【注意事项】
1 动植物的超活染色的不同。
2 液泡系超活染色应选用的根尖区域，不同区域的不同状态。
3 超活染色的取材特点。
实验五：植物有丝分裂染色体压片技术及组型分析
【目的和要求】
1 了解植物细胞周期中染色体的动态变化。
2 学习染色体常规压片技术。
3 掌握植物染色体核型分析的标准和方法。
【实验内容】
1 以蚕豆为材料，取蚕豆根尖预处理固定，进行有丝分裂压片，显微镜下找出中期相，绘制图片并描述形态。
2 以提供的蚕豆中期图片为材料，进行核型分析。
【重难点】
核型分析，其标准及原则。
【注意事项】
1 蚕豆根尖的选取。
2染色体中着丝粒位置的确定。
3核型分析中同源染色体的确定。
实验六：植物细胞骨架的光学显微镜观察
【目的和要求】
掌握植物细胞骨架处理及染色方法。熟悉细胞骨架的形态、组成及功能。
【实验内容】
细胞骨架的染色与观察，绘制细胞骨架图，描述细胞骨架形态。
【重难点】
骨架外蛋白的洗脱方法。
【注意事项】
1 洗脱液有毒性，用时要谨慎。
2 洗脱时坚持少量多次原则。
3 细胞骨架的绘制。
四、课程内容与学时分配表
五、教材与参考书
教 材：细胞生物学实验（第二版），高等教育出版社，杨汉民，2004年
参考书：精编细胞生物学实验指南（第一版），科学出版社，J.S.博尼费斯农等著，章静波等译，2007年
细胞生物学实验指导，高等教育出版社，李索文，2001年
细胞生物学实验技术，化学工业出版社，章静波，2006年
六、考核方式
本课程的实验考核采取平时实验操作与平时预习报告、实验报告完成情况相结合方式，按百分制综合评定成绩。实验操作成绩占70%，实验报告完成情况20%，预习报告10%。
（撰写人：林佳，审核人： 吴士筠 ，批准人： ）