课程代码编号：0631426
课程中文名称: 基因工程
课程英文名称：Gene Engineering
课程类型：专业课
课程对象类别：生物工程本科/必修
课程学分数：1.5学分
课程学时数：36学时
前导课程：生物化学、遗传学
一、课程教学目的
其主要任务是通过各个教学环节，使学生掌握生物工程的基本概念、基本原理与基因工程基本操作流程，了解当今基因工程领域的研究前沿。实验课是本门课程的重要教学环节，其目的是培养学生分析和解决实际问题的能力，使学生掌握基因工程基本实验技术，具备分析和整理实验数据的能力，为学好后续课程，从事专业技术工作和科学研究打下必要的基础。
二、课程教学要求
1、通过学习pcr、质粒抽提，琼脂糖凝胶电泳灯技术（包括实验方法、操作技术和一些基本仪器的使用等），使学生掌握基因工程的一些基本技术手段，培养学生具有初步的科学实验能力及严谨的科学作风。
2、掌握分子生物学的各种基本实验方法和实验技术，训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种基因工程实验仪器设备。
3、学会准确详实地记录实验现象和数据的技能，提高实验报告的写作能力。培养严谨细致的科学作风和团结互助的合作精神，鼓励学有余力的学生自行设计实验或参与实验教改，思想活跃，积极与老师交流意见，鼓励学生勇于创新。
4、将利用多媒体教学手段讲解实验的基本原理、方法及有关仪器的使用方法。。
三、课程教学内容与要求
实验一、植物和细菌总DNA提取
【目的和要求】
学习植物和细菌总DNA提取的方法和原理
【实验内容】
一、植物总DNA的抽提
二、细菌总DNA的抽提
三、琼脂糖电泳检测DNA
【重难点】
植物和细菌细胞破碎、DNA的沉淀
【注意事项】
液氮的使用，苯酚的腐蚀性
实验二、PCR基因扩增
【目的和要求】
学习PCR扩增反应的基本原理和实验技术。
【实验内容】
一、PCR扩增目的基因
二、电泳检测
【重难点】
反应参数的设定
【注意事项】
注意加样提体积的准确性
实验三、质粒载体的制备
【目的和要求】
学习碱裂解法提取质粒
【实验内容】
一、培养大肠杆菌
二、质粒抽提
三、电泳检测
【重难点】
溶液1、2、3的作用及转移上清液的方法
【注意事项】
操作动作要轻柔
实验四、基因及载体纯化
【目的和要求】
学习利用胶回收试剂盒从凝胶中回收DNA片段
【实验内容】
一、电泳检测
二、切胶
三、回收纯化DNA片段
四、电泳检测回收的片段
【重难点】
胶回收试剂盒的使用
【注意事项】
切胶要尽可能的薄
实验五、目的基因转化
【目的和要求】
一、 学习感受态细胞的制备
二、 学习外源片段转化大肠杆菌的方法
【实验内容】
一、菌体活化
二、制备感受态细胞
三、转化外源片段
【重难点】
感受态细胞的制备
【注意事项】
尽可能在冰上操作、一定要设置对照
实验六、重组体筛选
【目的和要求】
一、 学习蓝白斑筛选重组子的方法
二、 学习检测重组子的方法
【实验内容】
一、培养转化后的菌体
二、挑选可能含有重组子的白斑菌落
三、快速检测重组子
【重难点】
蓝白斑筛选平板的制备、快速检测重组子的方法
【注意事项】
注意仔细观察菌落的颜色
四、课程内容重点及学时分配
| 章节 | 内容 | 重点 | 学时分配 |
| 1 | 植物和细菌总DNA提取 | | 6 |
| 2 | PCR基因扩增 | * | 6 |
| 3 | 质粒载体的制备 | * | 6 |
| 4 | 基因及载体纯化 | | 6 |
| 5 | 目的基因转化 | * | 6 |
| 6 | 重组体筛选 | | 6 |
| 合计 | | | 36学时 |
五、课程教材与参考书（黑体五号）
教 材：基因工程实验指导（自编）
参考书：1. 奥斯伯 2005 《精编分子生物学实验指南》（第四版） 科学出版社
2. 黄培堂等译2007 《分子克隆实验指南》 （第三版）科学出版社
六、课程考核方式
根据实验报告成绩及课堂表现进行打分
实验报告成绩占60%，课堂表现占40%
（撰写人： 张凡 ，审核人：吴士筠 ，批准人： ）